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Wako人多能性干细胞无血清培养基 StemSure(R) hPSC培养基Δ

来源:作者:人气:-发表时间:2021-03-23 09:11:00【

Wako人多能性干细胞无血清培养基

StemSure® hPSC培养基Δ

【原理】
本产品是无饲养层条件下用于维持培养人ES细胞·iPS细胞的无血清,无动物源性成分的液体培养基。不含BSA及HAS等蛋白,批次间的差别较少,结果稳定。但是,本产品不含bFGF(碱性線成纤维细胞成长因子)。
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【特点】
●无血清、无饲养层培养人ES·iPS细胞
●使用人iPS细胞201B7细胞系,进行每批次的质量检测
●不含动物源成分
●不属于医药用外毒物或剧毒物,保存及处理简单
●不含蛋白的低蛋白培养基
●可使用Matrigel® 、iMatrix-511、Vitronectin等培养基质
●可使用Accutase, TrypLE Select等解离液
●传代培养时添加Y-27632可传代培养单细胞
【检测项目】
●细胞繁殖能力测试(使用人iPS细胞201B7细胞系)
●碱性磷酸酶染色(使用人iPS细胞201B7细胞系)
●无菌检测
●pH
●渗透压
●内毒素
●支原体检测
【使用注意】
●本产品不含bFGF(碱性成纤维细胞成长因子)。
●本产品需冷藏(-20℃)。溶解后无需再冷冻,请保存于2~10℃,并在1周内使用完毕。
【人IPS细胞201B7细胞系】
将使用A公司培养基(含有BSA、使用动物源成分)培养的人iPS细胞201B7细胞系移植到StemSure®hPSC培养基Δ,进行传代培养。下图为传代移植培养时的细胞形态及细胞集团倍增数、未分化性标记表达结果。
《细胞形态》
使用StemSure®hPSC培养基Δ 培养的人iPS细胞的形态与A公司培养基的几乎相同,没有发生分化,稳定地进行了培养。
《细胞群倍加数》
对比移植到StemSure® hPSC培养基Δ后的第1代到第5代的细胞,使用StemSure® hPSC培养基Δ的细胞繁殖状况更好。
<培养基成分> 
StemSure® hPSC培养基Δ + 35ng/ml bFGF
<细胞播种数>
1×105cells/well(使用6孔培养板)
《未分化性标记表达确认》
使用StemSure®hPSC培养基Δ培养至5代,观察到全部的未分化标记物(Nanog,Oct3/4,Tra-1-60,SSEA-4,BC2LCN)。
※BC2LCN是能与存在于人ES?iPS细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。
<培养基成分> 
StemSure® hPSC培养基Δ + 35ng/ml bFGF
<细胞播种数>
1×105cells/well(使用6孔培养板)
《未分化性标记表达确认》
使用StemSure® hPSC培养基Δ培养至5代,观察到全部的未分化标记物(Nanog, Oct3/4, Tra-1-60, SSEA-4, BC2LCN)。
※BC2LCN是能与存在于人ES ?iPS细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。
<数据提供 独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工学研究中心 小沼泰子老师、伊藤弓弦老师>
【人ES细胞201B7细胞系】
将使用A公司培养基(含有BSA、使用动物源成分)培养的人ES细胞201B7细胞系移植到StemSure® hPSC培养基Δ,进行传代培养。下图为传代移植培养时的细胞形态及细胞集団倍增数、未分化性标记表达结果。
《细胞形态》
使用A公司培养基的细胞,细胞在第2代以后出现了分化。另一方面,使用StemSure® hPSC培养基Δ的细胞,没有发生分化,稳定地进行了培养。
《细胞群倍增数》
比较两者移植到StemSure® hPSC培养基Δ后的第1代到第5代,细胞的繁殖能力没有差异。
<培养基成分>
StemSure® hPSC培养基Δ + 35ng/ml bFGF
<细胞播种数> 
1×105cells/well(使用6孔培养板)
《未分化性维持确认》
使用StemSure®hPSC培养基Δ培养至第6代,观察到全部的未分化标记物(Nanog,Oct3/4,Tra-1-60, SSEA-4,BC2LCN)。
※BC2LCN是能与存在于人ES?iPS细胞膜表面的糖链特异性结合的重组凝集素。
<数据提供 独立行政法人产业技术综合研究所 干细胞工学研究中心 小沼泰子老师、伊藤 弓弦老师>
核型解析
对使用StemSure® hPSC培养基Δ培养到第27代的人iPS细胞进行了核型解析,没有发现染色体异常。
 
<数据提供  独立行政法人国立成育医疗研究中心研究所 再生医疗中心 三浦巧老师、阿久津英憲老师>
【人iPS细胞201B7分化成三胚层】
使用StemSure® hPSC培养基Δ 将人iPS细胞201B7细胞系培养至第3代,再使用StemSure® 系列培养基进行驯化培养,可观察到βⅢ-Tubulin、α-SMA、AFP,因此判断细胞形成胚体后,进行了三胚层分化。
<培养基成分>
StemSure® D-MEM+StemSure® Serum Replacement+2mmol/l L-Glutamine+10mmol/l
StemSure® 2-Mercaptoetanol+1xNon-essential Amino Acids Solution
【产品列表】
产品编号
产品名称
产品规格
产品等级
197-17571
StemSure® hPSC MediumΔ
100ml
用于细胞培养
193-17573
StemSure® hPSC MediumΔ
100ml×4
用于细胞培养
064-05381
Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-freebFGF/FGF2
50μg
用于细胞培养
068-05384
Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-freebFGF/FGF2
100μg
用于细胞培养
060-05383
Fibroblast Growth Factor (basic), Human, recombinant, Animal-derived-freebFGF/FGF2
1mg
用于细胞培养
257-00511
Y-27632
1mg
用于细胞培养
253-00513
Y-27632
5mg
用于细胞培养
251-00514
Y-27632
25mg
用于细胞培养
253-00591
Y-27632 Solution,5mmol/l
300μl
用于细胞培养
220-02041
Vitronectin(20-398 aa), Human, recombinant,Solution
500μg
生物化学用
197-16275
StemSure® D-MEMHigh Glucosewith Phenol Red and Sodium Pyruvate
500ml
用于细胞培养
197-16775
StemSure® Serum Replacement
500ml
用于细胞培养
198-15781
StemSure® 10mmol/l 2-Mercaptoethanol Solution ×100
100ml
用于细胞培养
195-15791
StemSure® 50mmol/l Monothioglycerol Solution ×100
100ml
用于细胞培养
190-15805
StemSure® 0.1w/v% Gelatin Solution
500ml
用于细胞培养
199-16051
StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution
106units
用于细胞培养
195-16053
StemSure® LIF, Mouse, recombinant, Solution
106units×10
用于细胞培养
195-16031
StemSure® Freezing Medium
100ml
用于细胞培养
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